Szkolenie „IHC: praktyczne kompendium wiedzy o przeciwciałach i barwieniu tkanek” skierowane jest do osób zainteresowanych wiedzą teoretyczną i praktyczną na temat technik immunohistochemii i immunofluorescencji. W trakcie szkolenia uczestnicy zdobędą wiedzę na temat różnic i podobieństw technik IHC i IF, a także zapoznają się z praktycznymi przykładami i protokołami ich zastosowania.

Szkolenie obejmuje praktyczne aspekty doboru przeciwciał do doświadczeń, w tym omówienie różnych typów przeciwciał i ich produkcji. Uczestnicy zdobędą wiedzę na temat przygotowania tkanki do barwienia i etapów reakcji IHC/IF, w tym utrwalania tkanki, cięcia na skrawki, oraz szczegółowego protokołu reakcji.W trakcie szkolenia omówione zostaną także techniki łączenia IF z dodatkowymi barwieniami fluorescencyjnymi oraz z metodą 'uprzezroczystowienia tkanki’. Szkolenie ma charakter aplikacyjny i skonstruowane jest w sposób pozwalający na późniejsze wykorzystanie przedstawionej wiedzy w praktyce.

Program szkolenia:

• Wprowadzenie;

• Omówienie przeciwciał jako narzędzia do IHC/IF;

• Omówienie przygotowania tkanki do barwienia i etapów reakcji IHC/IF;

• Protokół podstawowy r-cji IHC i IF;

• Łączenie IF z dodatkowymi barwieniami fluorescencyjnymi;

• Łączenie IF z „uprzezroczystowieniem tkanki” – przykłady z użyciem gotowego kitu;

• Podsumowanie, sesja pytań i odpowiedzi.

Poziom szkolenia – podstawowy/średniozaawansowany.

dr Rafał Płatek – adiunkt badawczy w Laboratorium Biotechnologii Regeneracyjnej w Katedrze Biotechnologii Molekularnej i Mikrobiologii na Wydziale Chemicznym Politechniki Gdańskiej. Zainteresowania oraz praca badawcza dr. Rafała Płatka orientują się wokół tematyki uszkodzeń rdzenia kręgowego oraz poszukiwania i testowania terapii doświadczalnych dla uszkodzeń ośrodkowego i obwodowego układu nerwowego.

Dr Rafał Płatek ukończył kierunek biologii (spec. biologia molekularna) na Wydziale Biologii Uniwersytetu Warmińsko-Mazurskiego w Olsztynie w 2006 r. Następnie odbył studia doktoranckie w Instytucie Biologii Doświadczalnej im. M. Nenckiego PAN w Warszawie, gdzie w 2014 r. obronił doktorat w tematyce stymulacji procesów pro-regeneracyjnych w modelu uszkodzenia rdzenia kręgowego szczurów pod wpływem nadekspresji białka L1-CAM z wykorzystaniem wektorów AAV. Następnie dr Rafał Płatek odbył staż podoktorski w zespole Pana Prof. Leszka Kaczmarka w IBD, gdzie kontynuował badania w modelu rdzeniowym oraz rozszerzył swe zainteresowania o tematykę neurogenezy w modelu mysim. W czasie studiów doktoranckich oraz w okresie po odbył również krótkie staże zagraniczne odpowiednio w Getyndze i Heidelbergu w Niemczech oraz był uczestnikiem warsztatów Wings for Life w Hattingen, Niemcy (2016 r.), na które otrzymał stypendia wyjazdowe.

W obecnym zespole w LBR pod kierownictwem Pana Prof. Pawła Sachadyna w Politechnice Gdańskiej, dr Płatek kontynuuje prace badawcze nad terapią doświadczalną w modelu uszkodzenia rdzenia kręgowego myszy, z wykorzystaniem związków epigenetycznie aktywnych. Do tej pory praca zaowocowała wprowadzeniem do metodyki laboratorium mysiego modelu częściowego uszkodzenia rdzenia oraz kilku nowych w zespole protokołów m.in. uszkodzenia nerwu kulszowego, izolacji neuronów DRG czy rozwinięcia innowacyjnej metody szybkiego i powtarzalnego izolowania rdzeni kręgowych gryzoni (wewnątrzuczelniany grant PG). Wstępne wyniki zastosowania jednej z kombinacji związków pokazały obiecujące rezultaty w analizach sprawności lokomotorycznej uszkodzonych zwierząt. Badania są kontynuowane.

W pracy doświadczalnej dr Rafał Płatek wykorzystuje szereg metod m.in.:

– techniki mikrochirurgiczne (uszkodzenia rdzenia i nerwów obwodowych, iniekcje domózgowe i dordzeniowe),

– metody biologii molekularnej (izolacje DNA/RNA, RT-qPCR, siRNA),

– techniki rozdziału białek oraz immunoenzymatycznej i immunofluorescencyjnej identyfikacji antygenów (SDS-PAGE, Western Blotting, IHC, ELISA, IF, ICC),

– obrazowania mikroskopowego (mikroskopia światła przechodzącego, konfokalna, przyżyciowa),

– wybranych hodowli skrawkowych (siatkówka oka).

Dr Płatek był wykonawcą w grantach krajowych NCN (Opus) oraz NCBiR (Strategmed – „Regennova”; Techmatstrateg – „Bionanova”). Był również kierownikiem swojego grantu NCN (Preludium) oraz grantu Centrum Transferu Technologii Politechniki Gdańskiej. Jest też autorem publikacji z listy Filadelfijskiej, współautorem patentu, autorem licznych doniesień zjazdowych na konferencjach międzynarodowych i krajowych, jak też prelegentem na konferencji PTBUN, warsztatach mikroskopowych Kawa-ska (mikroskopy Leica) czy wykładach dla koła naukowego biotechnologów PG.