Immunohistochemia (IHC) i‎ Immunofluorescencja (IF):

Kompendium Wiedzy o Przeciwciałach

Zapraszamy do uczestnictwa w szkoleniu VOD osoby, które:

- są zainteresowane wiedzą teoretyczną i praktyczną o technikach IHC i IF,

- chcą poszerzyć i udokumentować swoje kompetencje,

- chcą wzbogacić personalne portfolio/CV,

- chcą wykorzystać przedstawione zagadnienia w praktyce badawczej.

Szkolenie ma charakter aplikacyjny.  Skonstruowane jest w sposób pozwalający na późniejsze wykorzystanie przedstawionej wiedzy w praktyce. Zostało podzielone na trzy części i zwieńczone egzaminem.

Szkolenie to nie tylko materiał wideo i certyfikat. W ramach dostępu do szkolenia każdy uczestnik ma możliwość zadania pytań, na które odpowie prowadzący - dr Rafał Płatek.

Kurs składa się z trzech części, które w klarowny sposób pomogą przejść od teoretycznej wiedzy do praktycznego jej wykorzystania w zakresie IHC i IF.

CZĘŚĆ I

1. Wprowadzenie:
   1. IHC/IF – definicja, zastosowanie;
   2. IHC vs IF vs ICC – rozróżnienie pojęć;
2. Przeciwciała jako narzędzia do IHC/IF:
   1. Ogólna budowa przeciwciał;
   2. Jak przeciwciała oddziałują z antygenami;
   3. Jakie mamy typy przeciwciał;
   4. Jak powstają przeciwciała.

CZĘŚĆ II

1. Utrwalanie materiału biologicznego:
   1. Cele utrwalania;
   2. Metody utrwalania + przykłady;
2. Przechowywanie tkanek/narządów po utrwaleniu, przed cięciem na skrawki;
3. Przygotowanie i krojenie tkanki na kriostacie;
4. Przechowywanie skrawków.

CZĘŚĆ III

1. Warianty r-cji IHC/IF;
2. Podstawowe i opcjonalne etapy typowej r-cji IHC/IF;
   1. Deparafinizacja;
   2. Odsłonięcie antygenów - Epitope Retieval (ER)/Antigen Retrieval (AR); opcjonalnie
   3. Wysycenie endogennych enzymów;
   4. Blokowanie niespecyficznego wiązania;
   5. Zamaskowanie endogennej biotyny;
   6. Immunoznakowanie antygenu;
   7. Systemy wzmacniania sygnału;
   8. Barwienia kontrastujące;
   1. Zaklejanie preparatów;
3. Przykłady podstawowych protokołów IHC oraz IF;
4. Kontrole w r-cjach IHC/IF.

Poziom szkolenia – podstawowy/średniozaawansowany.

Po zapoznaniu się z materiałem wideo zostanie udostępniony test, po jego rozwiązaniu automatycznie wygeneruje się certyfikat potwierdzający ukończenie szkolenia.

Prowadzący:
dr Rafał Płatek – adiunkt badawczy w Laboratorium Biotechnologii Regeneracyjnej w Katedrze Biotechnologii Molekularnej i Mikrobiologii na Wydziale Chemicznym Politechniki Gdańskiej. Zainteresowania oraz praca badawcza dr. Rafała Płatka orientują się wokół tematyki uszkodzeń rdzenia kręgowego oraz poszukiwania i testowania terapii doświadczalnych dla uszkodzeń ośrodkowego i obwodowego układu nerwowego.
Dr Rafał Płatek ukończył kierunek biologii (spec. biologia molekularna) na Wydziale Biologii Uniwersytetu Warmińsko-Mazurskiego w Olsztynie w 2006 r. Następnie odbył studia doktoranckie w Instytucie Biologii Doświadczalnej im. M. Nenckiego PAN w Warszawie, gdzie w 2014 r. obronił doktorat w tematyce stymulacji procesów pro-regeneracyjnych w modelu uszkodzenia rdzenia kręgowego szczurów pod wpływem nadekspresji białka L1-CAM z wykorzystaniem wektorów AAV. Następnie dr Rafał Płatek odbył staż podoktorski w zespole Pana Prof. Leszka Kaczmarka w IBD, gdzie kontynuował badania w modelu rdzeniowym oraz rozszerzył swe zainteresowania o tematykę neurogenezy w modelu mysim. W czasie studiów doktoranckich oraz w okresie po odbył również krótkie staże zagraniczne odpowiednio w Getyndze i Heidelbergu w Niemczech oraz był uczestnikiem warsztatów Wings for Life w Hattingen, Niemcy (2016 r.), na które otrzymał stypendia wyjazdowe.
W obecnym zespole w LBR pod kierownictwem Pana Prof. Pawła Sachadyna w Politechnice Gdańskiej, dr Płatek kontynuuje prace badawcze nad terapią doświadczalną w modelu uszkodzenia rdzenia kręgowego myszy, z wykorzystaniem związków epigenetycznie aktywnych. Do tej pory praca zaowocowała wprowadzeniem do metodyki laboratorium mysiego modelu częściowego uszkodzenia rdzenia oraz kilku nowych w zespole protokołów m.in. uszkodzenia nerwu kulszowego, izolacji neuronów DRG czy rozwinięcia innowacyjnej metody szybkiego i powtarzalnego izolowania rdzeni kręgowych gryzoni (wewnątrzuczelniany grant PG). Wstępne wyniki zastosowania jednej z kombinacji związków pokazały obiecujące rezultaty w analizach sprawności lokomotorycznej uszkodzonych zwierząt. Badania są kontynuowane.
 

W pracy doświadczalnej dr Rafał Płatek wykorzystuje szereg metod m.in.:
– techniki mikrochirurgiczne (uszkodzenia rdzenia i nerwów obwodowych, iniekcje domózgowe i dordzeniowe),
– metody biologii molekularnej (izolacje DNA/RNA, RT-qPCR, siRNA),
– techniki rozdziału białek oraz immunoenzymatycznej i immunofluorescencyjnej identyfikacji antygenów (SDS-PAGE, Western Blotting, IHC, ELISA, IF, ICC),
– obrazowania mikroskopowego (mikroskopia światła przechodzącego, konfokalna, przyżyciowa),
– wybranych hodowli skrawkowych (siatkówka oka).
 

Dr Płatek był wykonawcą w grantach krajowych NCN (Opus) oraz NCBiR (Strategmed – „Regennova”; Techmatstrateg – „Bionanova”). Był również kierownikiem swojego grantu NCN (Preludium) oraz grantu Centrum Transferu Technologii Politechniki Gdańskiej. Jest też autorem publikacji z listy Filadelfijskiej, współautorem patentu, autorem licznych doniesień zjazdowych na konferencjach międzynarodowych i krajowych, jak też prelegentem na konferencji PTBUN, warsztatach mikroskopowych Kawaska (mikroskopy Leica) czy wykładach dla koła naukowego biotechnologów PG.

Koszt dostępu do szkolenia na 6 miesięcy wynosi 199 zł